影之刃第二幕延续了系列暗黑武侠的世界观，核心人物围绕组织势力展开。冥主左殇作为第二幕的核心反派，曾是魂的挚友，后通过阴谋篡位成为组织新首领，其剑术造诣极高，性格冷酷且工于心计。玄鱼作为左殇的妻子兼组织冥使，擅长追踪与幻术，在剧情中多次与魂产生复杂的情感纠葛。魂作为系列主角，在第二幕中继续追寻真相，其战斗风格以高速连招和空中技巧为主，职业分支绝影与炽刃分别侧重空战与地面输出。
第二幕引入了多名新角色扩充势力版图。瓷儿作为机械术士，代表十一人阁势力登场，擅长操纵机关傀儡，其背景与天岭惨案密切相关。上官斩作为十一人阁的剑术高手，使用双剑作战，性格孤傲且剑法凌厉。沐小葵作为组织新生代成员，虽年纪尚小但战斗天赋出众，其双职业铁公主与玉玲珑分别侧重控制与爆发。这些角色通过支线任务逐步展现各自背景故事，共同构建起第二幕的江湖纷争。
部分前作人物在第二幕迎来重要转折。银月从组织叛逃后成为独立势力，其弓箭技巧与毒术构成独特战斗体系。瞳媚作为前组织冥使，在第二幕揭露更多与杀气改造实验相关的秘密。钩者与锤者作为组织基层战力代表，通过专属支线任务补充了世界观细节。这些角色的剧情发展均与主线天书残卷争夺战紧密关联。
锯者作为乙级鬼差，原为江湖恶徒风流窃颅使，被组织改造后成为嗜杀成性的刽子手。力者同为乙级鬼差，因改造失去头颅却获得惊人蛮力。药人系列敌人作为第二幕新增战斗单位，其变异形态与毒雾攻击机制带来全新挑战。这些设计在丰富游戏内容的同时，进一步深化了组织进行人体改造的黑暗设定。
从叙事结构来看，第二幕人物关系呈现多线交织的特点。左殇与魂的昔日友情现为敌对，玄鱼在忠诚与情感间的矛盾，十一人阁各成员迥异的动机，共同推动剧情向影境世界观更深处发展。角色台词中大量使用古龙式对白，配合水墨风过场动画，成功塑造出充满阴谋与背叛的武侠群像。所有重要角色的战斗风格均与其背景故事高度契合，例如瓷儿的机械傀儡对应其机关术世家出身，上官斩的双剑折射其追求武学极致的执念。
